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豬表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書
BS-4568 豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒
一、產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，專用于定量檢測豬血清、血漿、組織勻漿液及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的表皮生長因子(EGF)含量?。產(chǎn)品僅供科研使用，適用于豬只生長調(diào)控、疾病模型研究等領(lǐng)域。
二、檢測原理
固相抗體包被?：將抗豬EGF單克隆抗體預(yù)包被于微孔板形成固相載體?
抗原抗體反應(yīng)?：樣本中的EGF與固相抗體結(jié)合，再加入生物素標(biāo)記的二抗形成夾心復(fù)合物?
酶聯(lián)顯色?：加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，催化TMB底物顯色，顏色深淺與樣本中EGF濃度呈正相關(guān)?
定量分析?：450nm波長測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度?
三、試劑盒組成
組分 規(guī)格 保存條件
預(yù)包被微孔板 96孔/板 2-8℃密封
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干) 6管 -20℃
酶標(biāo)二抗 6ml 2-8℃避光
顯色劑A/B液 各6ml 2-8℃避光
終止液 6ml 室溫
20×洗滌緩沖液 20ml 室溫
樣本稀釋液 6ml 2-8℃
說明書 1份 -
四、樣本處理
采集要求?：
血清/血漿：EDTA抗凝，靜置析出血清后離心(3000rpm×15min)
組織勻漿：按1:9加入生理鹽水研磨，離心取上清
細(xì)胞上清：1000rpm離心10分鐘去除雜質(zhì)
保存條件?：
短期：2-8℃(≤3天)
長期：-20℃(避免反復(fù)凍融)?
五、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：
用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液配制480pg/ml原液，按2倍梯度稀釋至0pg/ml?
稀釋序列：480→240→120→60→30→0pg/ml
加樣反應(yīng)?：
每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl，空白孔不加
37℃孵育30分鐘，洗板5次?
酶聯(lián)反應(yīng)?：
加入酶標(biāo)二抗50μl，37℃孵育30分鐘
洗板后加入TMB顯色液，避光反應(yīng)10分鐘?
終止測定?：
加入終止液50μl，30分鐘內(nèi)測定450nm吸光度?
六、結(jié)果計算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
樣本濃度=標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合值×樣本稀釋倍數(shù)(建議5倍稀釋)
七、性能參數(shù)
指標(biāo) 參數(shù)
檢測范圍 7.8-500pg/ml?
靈敏度 2.51pg/ml?
批內(nèi)精密度 CV<6.6%
批間精密度 CV<7.9%
回收率 91-109%
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
豬表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生，您信任的合作伙伴!
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