聯(lián)系電話：
18502669006
服務(wù)熱線： 15502280048
服務(wù)熱線： 
BUNSEN快訊：ELISA試劑盒實驗中的封閉液等常用試劑的配制
ELISA試劑盒實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：
1.ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;
2.封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3.加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑"的作用。
4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可)，0.4%的明膠，但是實驗表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結(jié)合上的明膠。封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結(jié)合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上，結(jié)合抗體或抗原的時候就不會產(chǎn)生非特異結(jié)合了，不會影響實驗的準(zhǔn)確度。
ELISA實驗中緩沖溶液等試劑的配置
ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗，把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?/p>
1.ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
2.ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
3.ELISA實驗稀釋液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
4.ELISA實驗終止液(2M H2SO4)：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
5. ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
6.ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
7.ELISA實驗ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
8.ELISA實驗封閉液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長期保存。
ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
